汉坦病毒


汉坦病毒

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汉坦病毒概述汉坦病毒归属布尼亚病毒科,是一种有包膜分节段的负链RNA病毒,基因组包括L、M、S 3个片段,分别编码L聚合酶蛋白、G1和G2糖蛋白、核蛋白 。汉坦病毒包括引起肾综合徵出血热(HFRS)的汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)、汉城病毒(Seoul virus,SEOV)、普马拉病毒(Puumala virus,PUUV)、多不拉伐病毒(Dobrava virus,DOBV),引起汉坦病毒肺综合徵(HPS)的无名病毒(Sin Nombre virus,SNV)、纽约病毒(New York virus,NYV)、污黑小河沟病毒(Black Creek Canal virus,BCCNV)、牛轭湖病毒(Bayou virus,BAYV)、安第斯病毒(Andes virus,ANV)以及与人类疾病关係尚不清楚的一组病毒,如希望山病毒(Prospect Hill virus,PHV)、泰国病毒(Thailand virus,THAIV)、图拉病毒(Tula virus,TULV)、索托帕拉雅病毒(Thottapalayam virus,TPMV)、哈巴罗夫斯基病毒(Khabarovsk virus,KBRV)、El Moro Canyon病毒(ELMCV)、Rio Segundo病毒(RIOSV)、岛景病毒(Isla vista virus,ISLAV)、Muleshoe病毒(MULEV)、Bloodland lake病毒(BLLLV)、Rio Mamore病毒(RMV)、Topografov病毒(TOPV)等 。近年来随着新技术的套用和新型病毒的发现,汉坦病毒及其相关疾病的研究得以飞速发展 。1998年3月5~7日,第四届国际HFRS和汉坦病毒会议在美国亚特兰大市召开,与会的世界各国学者和专家交流了这一领域的最新研究方法和研究成果 。分类及分布汉坦病毒可两种:引起汉坦病毒肺综合徵(HPS),另一种引起汉坦病毒肾综合徵出血热(HFRS) 。前者主要流行于美国,在阿根廷、巴西、巴拉圭、玻利维亚以及德国也发现了病例 。中国虽未发现,但有发生的可能 。主要临床表现为,在4日左右的发热、头痛等前驱期症状后,出现以非心源性肺水肿和高病死率(52.4%~78.0%)为特徵的急性呼吸衰竭,重症3~7日死亡,生存者则很快恢复,无后遗症 。后者即中国常见的肾综合徵出血热,对其进行的分子生物学研究再一次证明其发病机制主要是病毒的直接致病作用,肾脏是早期原发性损伤器官,病毒是肾损伤的直接因素 。实验诊断汉坦病毒实验诊断方面的研究,主要集中于重组抗原的套用和实验诊断方法的快速、敏感和特异 。F.Elgh等採用PUU病毒重组核蛋白作为抗原,与乳胶连线进行乳胶微粒凝集试验,用于汉坦病毒病的快速血清学诊断,与採用PUU病毒重组核蛋白作为抗原的ELISA相比,特异性为90%,敏感性为94% 。Jiro Arikawa等将桿状病毒表达的HTN、SEO、PUU病毒核蛋白用于ELISA,至少套用2种重组抗原(HTN和PUU或SEO和PUU),可以用于汉坦病毒感染的血清学监测 。桿状病毒表达N端缺失的HTN或SEO病毒核蛋白作为免疫萤光试验(IFA)的抗原,可以区分HTN与SEO病毒感染 。重组核蛋白和N端缺失的核蛋白用于ELISA和IFA,提供了针对汉坦病毒感染的快速、敏感、安全的诊断方法 。H.Kallio-Kokko等将桿状病毒表达的PUU病毒核蛋白用于IgG和IgM检测,将大肠桿菌表达的PUU病毒核蛋白用于IgM检测,敏感性达100%,部分表达的核蛋白用于IgG检测,敏感性较低(70%) 。他们还报导了在PUU病毒感染的急性病例中,2/3的病例可以採用RT-PCR试验,从病人的血或尿中检出病毒RNA 。T.Tomiyama等将高密度正性颗粒包被纯化的汉坦病毒抗原,採用高密度颗粒凝集试验(HDPA)对病毒感染进行快速血清学诊断,对HTN病毒感染的检测有较高的敏感性和特异性,对PUU、SN病毒的感染也有低水平的交叉反应 。HDPA与IFA比较,敏感性相近,但比IFA 更为简便快速 。W.Irwin等报告了现场调查中免疫印迹试验在鼠类病毒抗体检测中的套用 。邱建明等採用5’端生物素标记汉滩病毒特异性寡核苷酸探针,结合磁性分离技术及改进的异硫氰酸胍-酚一步法两种方法提取病毒RNA,进行反转录套式PCR,用于检测临床HFRS病人血清 。在7d以内病人血清的阳性检出率为100%,8~14d病人血清的阳性检出率为57.14%,15d后病人血清仍能检测到22.73%阳性 。扩增产物经打点杂交检测证实为特异性扩增,这为早期确诊HFRS病人提供了特异、敏感、快速、直接的诊断方法 。