蛋白质谱的原理与使用 蛋白质谱分析( 二 )


氨基酸结构通式
氨基酸是蛋白质的基本单位,它们通过脱水和缩合连接成肽链 。蛋白质是由一条或多条多肽链组成的生物大分子,每条多肽链有二十到上百个氨基酸残基(-R) 。各种氨基酸残基按照一定的顺序排列 。蛋白质的氨基酸序列由相应的基因编码 。除了遗传密码编码的20种基本氨基酸外,蛋白质中的一些氨基酸残基在翻译后可以被修饰以改变其化学结构,从而激活或调节蛋白质 。多种蛋白质可以一起形成稳定的蛋白质复合物,往往通过结合在一起,并折叠或螺旋形成某种空结构,从而发挥特定的功能 。肽合成的细胞器是细胞质中粗面内质网上的核糖体 。蛋白质和中国的区别在于氨基酸的种类、数量、排列顺序以及肽链之间的结构空 。
摄入的蛋白质被消化水解成氨基酸,在体内被吸收,合成人体所需的蛋白质 。与此同时,新的蛋白质不断代谢,始终处于动态平衡中 。因此,食物蛋白质的质和量,各种氨基酸的比例,都与人体合成蛋白质的量有关,尤其是青少年的生长发育、孕妇的优生优育、老年人的健康长寿,都与饮食中蛋白质的量密切相关 。蛋白质分为完全蛋白质和不完全蛋白质 。富含必需氨基酸的蛋白质称为完全蛋白质 。比如牛奶、鸡蛋、鱼、肉都属于完全蛋白质,植物中的大豆也含有完全蛋白质 。缺乏必需氨基酸或含量很少的蛋白质称为不完全蛋白质,如谷类、小麦、玉米中的蛋白质,动物皮和骨头中的明胶 。
蛋白质质谱有什么要求?
之一个质谱仪用于测量相对分子量 。如果小分子多肽对目标卵有益,那么相对分子量应该等于目标蛋白的相对分子量 。
第二年春天,我们需要测试蛋白质是否有效 。要用抗原抗体杂交技术,单靠质谱是做不到的 。
如何用HPLC检测蛋白质的纯度和含量?还是测分子量?
之一,蛋白质一般用凝胶渗透色谱法测定 。
分子量的测定:用HPLC测定几种已知分子量的蛋白质,绘制保留时间调整对应的标准曲线 。然后在相同条件下测定未知蛋白的保留时间,并将未知蛋白的分子量与标准曲线进行比较 。
含量测定:用蛋白质标准样品配制一系列不同浓度的蛋白质溶液,绘制蛋白质浓度与峰高/峰面积相关性的标准曲线,然后在相同条件下测定样品的峰高/峰面积,得到未知样品的浓度;
纯度检测:当待测样品中的所有组分都有峰时,用目标蛋白的峰面积/峰高除以孙勤中所有峰面积/峰高之和,即可得到目标蛋白的纯度 。
蛋白质质谱特定过程 。
质谱技术在蛋白质组学中的应用
王海龙杨静市齐针郭跃蓝秀
包头医学院生物化学与分子生物学系,内蒙古包头;赤峰之一医院’)
中国图书馆分类号(}so3文献识别号ANo 。1006-740x (2006年)
蛋白质组学是后基因组时代的一个新领域 。
在细胞或有机体中以蛋白质水平表达的基因的完整蛋白质 。
定性和定量研究,以揭示生命的过程和解释基因表达控制 。
系统的机制 。蛋白质组学分为蛋白质组学的表达(例如 。
表达蛋白组)和细胞图蛋白(细胞图
),前者指细胞和组织中表达的蛋白质的定量 。
图谱依赖于二维凝胶电泳图谱和图像分析,可以作为一个整体使用 。
在蛋白质水平上,我们研究细胞的通路,以及疾病、药物和它们的
这是生物造成的障碍,所以它可能会发现疾病的迹象 。
并阐明生物学途径;后者指的是细胞器或蛋白质的纯化 。
用质谱鉴定化合物和蛋白质成分,并测定蛋白质和蛋白质 。
相互作用的亚细胞位置] 。20世纪90年代以来,随着人类基础的发展 。