关于哈茨木霉与根腐病！！！！！( 二 ) _突变

利用T-DNA整合的方式，产生木霉菌突变体并进一步筛选的方式十分普遍。黄亚丽等（2010）通过对T.转化效率的因素具体研究，建立了转化效率高的体系，建立了含有8千多个转化子的突变体库。黄亚丽等（2010）还研究了整合过程中的机制，他们根据T.的基因组特点，采用12条随机的AD引物，并分别与3条右边界嵌套特异引物的组合对T.突变子的T-DNA侧翼未知序列进行扩增，选出扩增效率最高的引物AD5 ，对T.的52个突变子进行Tail-PCR扩增，分析扩增序列后发现，获得的42条侧翼序列中，有7条只含有质粒序列， 33条为单一的侧翼序列，其余2条的序列相同。其中34条T-DNA侧翼边界序列中1/3的序列保存着完整的右边界，其余则出现了不同程度的缺失，研究说明，在农杆菌介导转化T.的过程中，会对T-DNA右边界产生一定的剪切作用。
紫外诱变和化学诱变的方法也常被用于T. 针对性性状筛选突变体系的构建。杨合同等（2004b）通过紫外线诱变处理，获得了可以在低温下（10e）生长的绿色木霉LTR-2的快速生长型突变株LR ，以及对多菌灵具有抗性的突变株LRR 。突变株对棉枯萎病菌、棉黄萎病菌、棉立枯病菌的平板拮抗能力一般低于野生型菌株。与野生型菌株相比，突变株在PDA平板上对棉花立枯病菌、枯萎病菌和黄萎病菌的抑菌圈都有变化，但是多数情况下抑菌圈变小而不是变大。LRR虽然对棉枯萎病菌和黄萎病菌的抑菌圈也较小，但是对两种病害的防治效果却略有提高。LR比LTR-2更能适合非根际土壤环境，而LRR在健康棉花根际的定殖能力上，比LTR-2有明显下降。LR对棉花立枯病基本没有防治效果，但对棉花黄萎病和枯萎病的防治效果则高于原始菌株；LRR对棉花上述3种病害的防治效果与原始菌株没有明显的差异。在PDA、玉米琼脂和NA平板上菌株LR生长速度最快，而LRR则与野生型菌株LTR-2没有明显差别。除了突变株LR在非根际土壤中的定殖能力有所提高以外，其他突变株的根际定殖能力没有明显改善， LRR定殖能力反而明显下降。该研究一方面表明紫外线诱变后目标性状变化的随机性，另一方面也说明定殖能力与抗药性间没有必然关系。紫外线诱变处理所获得的新性状容易消失，但也能够得到稳定的突变株。对木霉来说，紫外线诱变仍然是值得利用的菌株改良技术，在扩大突变体筛选基数的基础上，能够获得所需要的突变株。
等（2005）将 T. 暴露于伽马射线中，诱导两株耐盐突变菌——和。在盐胁迫条件下，两株突变体的生长能力、孢子形成能力、拮抗病原菌能力均远超野生型。
安哲宇等（2010）通过紫外诱变和含药培养基诱导相结合的方法，获得了一株对三唑类杀菌剂有良好耐药性的T.的突变体， TUV-13 。其抗药性为野生菌株的10倍，不同世代中的抗性比较稳定，且与原始菌株存在差异。该菌株可定殖于植物体内，植株生长产生正效应。杨春林等（2010）同样采用紫外线诱变与药剂培养驯化相结合的方法，构建了以T. Th-30为原始菌株的突变体。他们共得到4株可以比正常菌株耐受10倍福美双的变异菌株。其中，变异菌株UV-4不仅能抵抗高浓度福美双的胁迫作用，还具有几丁质酶活性。该菌株遗传性状稳定，具有福美双混用协同防治蔬菜真菌病害的功效。Zhang等（2013）的研究切入点侧重在突变体木霉对作物的促生效果上。研究通过紫外线诱变的方法从亲本SQR-T037菌株中得到124株突变体后代，并从中选择了拮抗植物病原菌能力较强的T-E5进行下一步的研究。他们比较了T.突变体菌株T-E5与野生型菌株SQR-T037 ，同时以施用有机肥料作为对照。研究中包括实验室和黄瓜温室试验，即对液体发酵液中植物激素的产出、对植物生长的促生能力和在植物根系根围的定制能力进行了分析评定。结果显示， T-E5相对SQR-T037 ，在植物生长素IAA的效率指标中提高了30.2%；相应的， T-E5处理显著提高了黄瓜无论在土壤栽培还是水培条件下的生物量。通过RT-PCR检测，在培养30d后，突变体T-E5在土壤样品中的定殖量几乎超过SQR-T037的10倍。两菌株在植物根茎内的定殖速率几乎是一致的；但每个取样时间中T-E5的定殖率均高于野生型的SQR-T037 。