桃树一般用什么杀菌剂治疗病害？( 二 )

桃潜隐花叶类病毒病是怎样检验与检疫的？
目前检测主要采用生物学、凝胶电泳和分子生物学方法。
鉴别寄主：
木本指示植物：生物学方法将待检毒源嫁接到寄主上，根据其症状表现来确定类病毒的一种方法。现在仍作为一种基本的诊断方法应用于植物类病毒的检测中。但这种方法周期长，费时、费力，且易受外界环境条件的影响。所以，不适于类病毒的快速检测。常用的指示植物为桃树苗（GF305品种）鉴定方法有以下三种：
（1）温室鉴定。
症状出现时间和严重度，因病毒株系不同而异。潜隐株系一般不产生症状，但在某些情况下，也有1%的接种株表现出花叶症状，病斑主要分布在叶脉附近。强毒株系则产生较大的黄色病斑。叶片生长停止，出现小而窄的薄叶。接种30～60d后，接种株上出现较强的症状反应，叶片卷曲和变红，茎干上出现溃疡斑死亡。有时症状较轻，仅叶片卷曲，茎干上产生茎痘斑。

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（2）交叉保护技术鉴定。
主要用来检测潜隐株系。即用GF305作指示植物，先在上面嫁接一个待检芽。两个月之后，再接种强毒株系芽。如果指示植物不表现症状，就说明待检芽带有潜隐株系。
（3）田间鉴定。
潜隐株系侵染，叶片伸展期推迟4～6d ，指示植物仅在接种后第二年开花。它们也引起叶片扭曲，沿主脉产生褪绿斑驳。果实少而小，果核变大，成熟期推迟4～6d 。强毒株系侵染， 5～6月叶片产生褪绿花叶（污斑）或黄叶花叶症状。1/3的接种树，茎干上产生茎痘斑。
血清学检测：凝胶电泳即双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（PAGE）（. ， 1991;. ， 1992），是根据类病毒的特殊分子结构来检测类病毒的技术。这种技术快速、简单且投入少，在类病毒检测的早期阶段，被广泛地应用并不断完善。但其精确度较低，而且PAGE电泳只能诊断出是待检材料中是否有类病毒的存在，不能对类病毒的种类作进一步的鉴定。电泳法检测的灵敏度不如交叉保护法。
分子生物学检测：主要包括核酸分子杂交、RT-PCR技术及最近报道的RT-PCR-探针捕捉杂交（也称RT-PCR-酶联免疫反应）等。核酸分子杂交技术是较为常用的类病毒的检测方法，特别是光生物素、地高辛等非放射性标记技术的发展，大大提高了实验的安全性。核酸分子杂交技术特异性强，克服了PAGE电泳的不足，但其检测的准确性依赖于模板的质量，而类病毒在寄主中含量又较低，致使检测结果常存在假阴性的问题。RT-PCR技术的引入（， 1990；. ， 1991；， 1991；， 1992；. ， 1994），提高了类病毒检测的灵敏度。等（1999年）曾同时用RT-PCR和核酸分子杂交两种方法检测类病毒，发现前者的灵敏度是后者的10～100倍。但RT-PCR技术存在假阳性的问题，而且引物的设计和反应条件也影响检测的准确性。RT-PCR-探针捕捉杂交技术是RT-PCR和核酸分子杂交技术的结合，综合了二者的优点，使检测RT-PCR的扩增产物的灵敏度比传统的凝胶电泳提高了至少100倍。在杂交中以cRNA探针代替cDNA探针，又可以提高检测的灵敏度。