大生化检验组合等多长时间,半自动生化分析仪工作原理( 七 )


2.两点速率法即所谓拟一级速率法 。在反应中选取两时问点t 1、t 2,读取吸光度A 1、A2,计算(A2-A1),(t2-t1)=△A,△t 。此方法与终点两点法的区别主要有两点:后一读数点反应未达终点,以速率计算结果 。它与连续监测法比较,缺点在于人为确定t 1、t 2,不定因素较多,不能保证反应在t 1-t 2期间呈线性,影响结果准确性;应在常规测定前,先做预试验来确定线性时间段 。若在选择的时间段内反应不成线性(如零级反应期短,仪器无法设置或测定),则只能改用终点法 。优点在于方法简单;酶活力较低、测定吸光度值较小时,可增加测定时间段而不受仪器连续监测时间点的局限,减少读数误差 。
3.速率B法在一个通道内一次进行两项反应相关的速率法测定 。它既可以是两项试验测定,也可用于干扰或/及样品空白自动补偿0后一用途的原理是:利用仪器的微机自动处理,在第一反应(干扰反应)一直维持线性的前提下,可以从第二反应(主反应)速率中扣除第一反应速率的延续影响 。如用于消除胆红素转化为胆绿素吸光度下降、对肌酐苦味酸法测定的负干扰等 。某些仪器(如HITACHI系列)设置此方法 。
(三)空白(blank)校正
在分光光度法中,常利用空白溶液来调节仪器的吸光度零点,或用来抵消某些测定的干扰因素 。在生化分析仪测定中,除了采用双或多波长、两点法等排除背景干扰外,常要运用专门空白测定,以便从样品测定吸光度中扣除其影响 。正确选择空白校正,对提高准确度起重要作用 。
1.试剂空白一般在方法类型和校准模式中,即分为有或无试剂空白两大类 。试剂空白单独测定或与校准配合测定,并需预选装载去离子水样品杯或试剂空白架 。校准或病人样品的各测定点吸光度,均要扣除相应测定点的试剂空白吸光度或空白速率值 。无试剂空白的方法,多直接以反应杯的水空白作为测定基准值 。
在不少仪器中,试剂空白测定类似校准测定,并非在病人样品测定时实时测定 。所以,要注意它的测定频率,避免因试剂批号或质量的变化造成试剂空白的改变引起的计算误差 。
2.样品空白 主要为了消除样品本身混浊或色度的干扰 。常采用空白通道法,测定校正结果=显色反应通道结果-空白通道结果 。多数仪器须另外占用测定通道,分析速度减半,但去干扰的准确性应高于两点终点
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大生化检验组合等多长时间,半自动生化分析仪工作原理

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