油菜叶向上卷起皱缩,植株矮小,叶片边缘有一圈黄斑,请专家看看这是怎么了,谢谢!( 三 )


油菜花叶病毒病的理化性质是什么?
病毒名称:油菜花叶病毒virus(YoMV) 。分类地位:烟草花叶病毒属,未定科 。病毒的提纯:新鲜病叶于-15℃下冷冻过夜,榨汁,残渣加磷酸氢二钾浸渍2~3次,合并滤液于30~50℃中保温20min再加0.2%~0.5%正丁醇搅拌10min,离心2800r/min,30min除去沉淀,上清液加25%(pH7.2)硫酸铵,再于2800r/min,离心30min,将沉淀悬浮于0.02mol/L(pH7.2)磷酸盐缓冲液中,再加入pH4.5,0.2mol/L醋酸钠缓冲液调整酸度至pH6,然后于5000r/min,离心10min 。重复进行醋酸沉淀和离心数次,最后将沉淀加少量水溶解,再用蒸馏水透析、离心除去少量寄主蛋白即可得病毒制剂 。呈典型核蛋白曲线 。本分离物提纯制剂电泳只出现一个峰 。但如与TMV混合进行电泳则出现双峰 。病毒理化特性:①病毒粒子:电镜观察为长300nm*18nm的棒状病毒、长短轴比约为23,极易聚集成束,分层形成纺锤体 。沉降系数:192S 。A260/A280为1.09,等电点:pH5.35 。分子质量:38*106u 。②核酸:病毒的核酸RNA,含量为5.12%,核酸含磷量为8.8% 。
A260/A280为0.48,G∶A∶C∶U=23.2∶28.0∶19.9∶29.0 。③蛋白:蛋白总N量16.4%,在67%氯乙醇中,蛋白分解为亚基,其分子质量为15000~,每一亚基系由一条无自由α氨基,而以苏氨酸为C端的肽链组成,形成具有直径40A的空心棒状外壳 。其氨基酸组成为Cys1,Asp14,Thr10,Ser12,Glu20,Pro8,Giy3,Ala19,Vla10,Mel3,Ileu6,Leu14,Tyr7,Phe6,Lys2,His1,Arg10,Tty3,共149个氨基酸 。利用Niu的方法测定油菜花叶病毒的上端五个氨基酸,结果表明分别为Ser、Gly、Pro、Ala、Thr与TMV普通株系的C端相同 。其他:油菜花叶病毒与TMV的普通株系(TMVc)具有类似的寄主范围,有交互血清反应,相似的体外抗性,相同的侵染方法,同属于烟草花叶病毒属成员 。但油菜花叶病毒对TMV在烟草上的干扰作用极弱,同时接种两种病毒,在接种后2~3d油菜花叶病毒占优势,以后则TMV浓度逐渐超过油菜花叶病毒 。油菜花叶病毒的等电点为pH5.35比TMV的pH3.7高,沉降系数为192S比TMV的188S高,消光系数27.2比TMV的29.1低,衣壳蛋白亚基分子质量低于TMV的 。
油菜花叶病毒-RNA在麦胚无细胞体系中对“C小球藻蛋白水解液渗入的最适浓度为270ng/ml,而TMV的最适浓度为160ng/ml 。全长的TMV—RNA在体外体系中不能指导合成其衣壳蛋白 。但全长的油菜花叶病毒-RNA却可翻译出衣壳蛋白 。在麦胚体系中油菜花叶病毒-RNA指导合成的产物主要是油菜花叶病毒衣壳蛋白(16.5K),其次是36K、25K和19K的蛋白,而TMV-RNA指导合成的为35K、30K、22K和17K的蛋白,其17K的蛋白虽与油菜花叶病毒的16.5K的衣壳蛋白分子质量相近,但经放射免疫沉淀试验,与TMV的衣壳蛋白无免疫沉淀反应 。应用互补DNA进行同源与异源的分子杂交表明,YMV与TMV的普通株系、番茄株系、地黄株系等亲缘均较远 。此外油菜花叶病毒的氨基酸组成与TMVc相差亦较大,TMVc有158个氨基酸而YMV只有149个,且大部分氨基酸的含量亦各不相同 。油菜花叶病毒含有组氨酸和甲硫氨酸有别于TMVc而与长叶车前花叶病毒相同,但其C端六肽的末五个氨基酸组成却与TMVc相同,而不同于长叶车前花叶病毒 。在酶降解碎片的N末端中油菜花叶病毒只有10个残基不含苏氨酸和甘氨酸,但有丙氨酸 。而TMVc的N末端却有11个残基,并含有苏氨酸和甘氨酸而没有丙氨酸,两者亦有不同 。综上所述,认为油菜花叶病毒为烟草花叶病毒属的一个成员 。
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